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吉凯基因AAV病毒
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上海吉凯基因医学科技股份有限公司

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    付经理

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    上海 浦东新区

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    技术服务、试剂

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公司新闻/正文

吉凯基因AAV病毒介绍及应用案例、相关引用文献

1552 人阅读发布时间:2025-03-06 17:36

产品名称 试用装规格 备注
AAV感染脂肪细胞套装 1.00E+11 v.g AAV9-FABP4-EGFP,AAV9-AdipoQ-EGFP
AAV感染平滑肌细胞套装 4.00E+11 v.g AAV9-SM22a-EGFP
AAV感染骨骼肌细胞套装 1.00E+11 v.g AAVrh74-MCK-EGFP
AAV感染肠道上皮细胞套装 4.00E+11 v.g AAV8-villin-EGFP,AAV8-CMV-EGFP
AAV感染少突胶质细胞套装 6.00E+10 v.g AAVMG1.2-MBP-EGFP,AAVMG1.2-CNP-EGFP,AAVMG1.2-MAG-EGFP,AAVMG1.2-NG2-EGFP
AAV感染泛组织套装 4.00E+11 v.g AAVDJ-CMV-EGFP
AAV感染血管内皮细胞套装 4.00E+11 v.g AAV9-TIE-EGFP,AAVENT-TIE-EGFP,AAVENT-TIE2-EGFP,AAVENT-CMV-EGFP
AAV感染星形胶质细胞套装 6.00E+10 v.g AAV5-GFAP-EGFP
AAV感染神经元细胞套装 6.00E+10 v.g AAV9-hsyn-EGFP
AAV感染外周套装 4.00E+11 v.g php.s-CMV-EGFP
AAV感染皮肤角质细胞套装 2.00E+11 v.g AAV2-K14-EGFP,AAV2-CMV-EGFP
AAV感染巨噬细胞套装 2.00E+12 v.g AAV6-CD68-EGFP,AAV6-F4/80-EGFP,AAV9-CD68-EGFP,AAV9-F4/80-EGFP
AAV感染肝星状细胞套装 4.00E+11 v.g AAV8-α-SMA-EGFP,AAV8-GFAP-EGFP,AAV8-CMV-EGFP
AAV感染表皮细胞、真皮细胞套装 2.00E+11 v.g AAV2-CMV-EGFP
AAV感染视网膜色素上皮细胞套装 1.00E+10 v.g AAV2-rpe65-EGFP,AAV2-CMV-EGFP
AAV感染肺泡上皮细胞套装 2.00E+11 v.g AAV9-SPC-EGFP,AAV6-SPC-EGFP,AAV6-CMV-EGFP
AAV感染肝实质细胞套装 4.00E+11 v.g AAV8-TBG-EGFP,AAV8-hAAT-EGFP
AAV感染肾小球足细胞套装 4.00E+11 v.g AAV9-Nephrin-EGFP
AAV感染肾小管细胞套装 4.00E+11 v.g AAV9-KSP-EGFP
AAV感染心肌成纤维细胞套装 2.00E+11 v.g AAV9-Periostin-EGFP
AAV感染心肌细胞套装 2.00E+11 v.g AAV9-cTT-EGFP
AAV感染成骨细胞套装 1.00E+11 v.g AAV9-RUNX2-EGFP
AAV感染神经干细胞套装 6.00E+10 v.g AAVSCH9-CAG-EGFP,AAVSCH9-nestin-EGFP
AAV感染脑微血管套装 2.00E+12 v.g AAVX1.1-CAG-EGFP
AAV感染软骨细胞套装
1.00E+11 v.g AAV9-COL2A1-EGFP
AAV感染胰腺细胞套装
2.00E+12 v.g AAVPan-CMV-EGFP,AAV8-CMV-EGFP
AAV感染小胶质细胞套装
1.00E+11 v.g AAV11-IBA1-EGFP

 

优势

AAV相比于其他病毒载体的优势:

a.表达时间长:绝大多数重组rAAV不会整合到基因组上,而是在宿主细胞中串联形成附加体(episome)存在于细胞核中,细胞在细胞复制和分裂后会丢失附加体,并因此失去基因表达能力,rAAV在细胞分裂不旺盛的组织中可持续表达6个月以上;

b.扩散性强:rAAV的体积小,滴度高,因此具有远高于腺病毒和慢病毒的扩散性,可以穿透血脑屏障,是理想的神经元和胶质细胞感染工具;

c.特异性强:rAAV有十数种常用的血清型,不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力,是动物实验优选;

d.安全性高:目前还没有发现AAV对人体致病,是美国FDA批准的可以直接用于人体基因治疗的最安全的病毒载体;

e.免疫原性低:当AAV用局部大剂量感染肌肉、脑、眼等组织时,不易造成免疫反应;

f. 高稳定性:rAAV病毒在4℃可以保存1周,并且对氯fang等试剂具有抗性。

病毒表达系统 腺相关病毒
(Adeno-Associate virus)
慢病毒
(Lentivirus)
腺病毒
(Adenovirus)
病毒基因组 单链DNA病毒 RNA病毒 双链DNA病毒
复制 条件复制 不可复制 条件复制
滴度 最高可达1012-13v.g/ml 最高可达109TU/ml 最高可达1012pfu/ml
感染细胞类型 感染分裂不旺盛的细胞 感染分裂和不分裂细胞 感染分裂和不分裂细胞
表达丰度 高水平表达 中到高水平表达 高水平表达
表达时间 1-2周 慢(2-4天) 快(1-2天)
持续表达时间 病毒基因组游离于宿主基因组外,
在分裂不旺盛的细胞中可长时间表达
病毒基因组整台于宿主基因组,
长时间、稳定表达外源基因
病毒基因组游离于宿主基因组外,
瞬时表达外源基因
克隆容量 适合表达小于2.8kb的外源片段 适合表达小于4kb的外源片段 适合表达小于5kb的外源片段
免疫原性 低免疫原性 低免疫原性 较高免疫原性
安全性 暂无发现致病性,
已通过欧盟和FDA许可,
用作基因治疗药物的载体
暂无发现致病性,
已被用于CAR-T治疗作用于人体
可能会引起一些咳嗽流涕

包装服务

想要了解吉凯基因腺相关病毒包装完整流程,请点击这里下载腺相关病毒构建包装报告>>

 

新闻图片1

血清型选择

根据衣壳蛋白的差异,目前AAV可分为12种血清型(AAV-1~AAV-12)和100多种变异体。不同的AAV具有不同的衣壳蛋白空间结构、序列和组织特异性,因而其识别与结合的细胞表面受体也相应有很大差别,这也导致不同血清型转染的细胞类型和感染效率也各不相同,那么如何选择合适的血清型呢,首先我们需要了解下AAV不同血清型的组织趋向性。

血清型 简介
1 顺行示踪跨单突触。适合神经等方向的研究
2 胞外吸附分子为硫酸乙酰肝素蛋白多糖,适合于神经等方向的研究
5 胞外吸附分子为N-唾液酸,适合肺、眼睛、神经等
6 适合血液细胞,比如T细胞
8 适合肝脏,受体为LamR
9 最广谱的血清型,感染全身效果极好,可以穿过血脑屏障、眙盘屏障
DJ 适合体外实验、细胞
DJ/8 适合肝脏,眼,中枢神经,肌肉
PHP.eB 基于PHP.B,加强版,更适合中枢神经系统
PHP.B 在神经元和神经胶质中感染效率超高,大约是9型的40倍。
PHP.S 能够感染外周神经元
Retro 逆向标记血清型

 

吉凯为您总结不同部位适合的血清型,供您参考。

  1 2 5 6 8 9 DJ PHP.eB PHP.S Retro
心脏              
肝脏            
             
胰腺              
骨骼肌          
神经    
眼部          

 

吉凯小建议:

1.如您不确定选择哪种血清型,可尝试使用感染谱最广的9型。

2.如初次使用AAV,可使用AAV彩虹装进行预实验,通过彩虹装比较不同血清型对目标组织的感染效果,摸索最佳的注射方法、注射位点、病毒用量等,以便得到更理想的实验结果。

 

AAV彩虹装

AAV彩虹装是吉凯基因通过查询相关文献,将适合不同组织的常用血清型组合而成的套装产品。

 

彩虹装 血清型 提供量
眼/其他器官 1/2/5/6/8/9/DJ 10μL/种血清型
神经系统 1/9/Retro/PHP. eB 10μL/种血清型
肝脏/肾脏 2/8/9/DJ 100μL/种血清型
心脏/血管/肌肉 1/6/8/9 100μL/种血清型

*各血清型在神经系统研究中作用:1型,可作为顺行示踪跨单突触标记的血清型使用;9型,可作为顺行示踪非跨突触标记的血清型使用;Retro,可作为逆向示踪非跨突触标记的血清型使用;PHP.eB,适合中枢神经系统,可穿过血脑屏障、胎盘屏障,常通过尾静脉注射使用。

载体选择

吉凯提供多种AAV载体,可通过过表达、RNAi等技术操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。点击查看载体图谱>>

调控方式 载体编号 元件顺序 载体容量(bp) 荧光 荧光是否
融合表达
过表达 GV388 CMV bGlobin-MCS-EGFP-3FLAG-WPRE -hGH polyA 1207

EGFP

融合
GV389 CMV bGlobin-MCS-mCherry-3FLAG-WPRE-hGH polyA 1207 mCherry 融合
GV410 CMV bGlobin-MCS-3FLAG-T2A-EGFP 1130 EGFP 非融合
GV411 CMV-betaGlobin-MCS-3Flag-SV40 PolyA 2819    
GV461 CMV-betaGlobin-MCS-SV40 PolyA 2890    
GV467 CMV- betaGlobin-MCS-EGFP-3Flag-SV40 PolyA 2095 EGFP 融合
GV489 CMV bGlobin-EGFP-MCS-WPRE-hGH polyA 1285 EGFP 融合
GV466 hSyn promoter-MCS-EGFP-3FLAG-SV40 PolyA 2186 EGFP 融合
GV475 hSyn promoter-MCS-mcherry-3FLAG-SV40 PolyA 2186 mCherry 融合
GV488 gfaABC1D promoter-MCS-EGFP-WPRE-bGH PolyA 1591 EGFP 融合
干扰 GV478 U6-MCS-CAG-EGFP   EGFP 非融合
GV480 U6-MCS-CAG-mCherry   mCherry 非融合
miRNA-up GV412 CMV bGlobin-EGFP-MCS-WPRE-hGH polyA   EGFP 非融合
GV413 CMV bGlobin-mCherry-MCS -WPRE-hGH polyA   mCherry 非融合
miRNA-down GV479 U6-MCS-CAG-EGFP   EGFP 非融合
GV480 U6-MCS-CAG-mCherry   mCherry 非融合

 

特色产品

1.自互补AAV(scAAV)

scAAV(self-complementary adeno-associated virus,中文名为双链腺相关病毒或者自我互补腺相关病毒),是基于ssAAV改造而成的一种病毒基因组是自我互补型双链DNA的AAV。ssAAV病毒颗粒感染细胞后,借助细胞的DNA聚合酶复制出第二条链后才能表达。除了第二条链合成途径,多个ssAAV进到细胞后,部分正链基因组分子和负链基因组分子也能退火形成dsDNA。当AAV载体上的基因组长度小于野生型AAV基因组长度的一半,包装出的病毒颗粒也会出现含有二聚体形式的基因组。这些病毒转导细胞后,二聚体形式的基因组自行退火形成dsDNA,从而绕过了第二条链合成的这一步限速步骤。

 

新闻图片2

scAAV特点:

•   优点:一周快速表达、表达效率高

•   缺点:容量只有ssAAV一半,为2.5k

 

新闻图片3

rAAV与scAAV表达水平及时间对比

引用自:[1] Mccarty R J . Self-complementary recombinant adeno-associated virus (scAAV) vectors promote efficient transduction independently of DNA synthesis.[J]. Gene therapy, 2001, 8(16).

2.现货AAV产品

光遗传、化学遗传、钙指示剂是神经研究常用的技术。登录吉凯商城查询与购买:光遗传、化学遗传、钙指示剂等现货AAV产品,此外,还有荧光示踪、重组酶、AAV彩虹装等现货AAV产品,共108种类,满足您不同的实验需求。

现货AAV产品涵盖2/5/8/9四种血清型。最快5个工作日发货。

3.组织特异性启动子AAV

吉凯提供百余种组织特异性启动子AAV载体(下图),可快速实现动物水平组织特异性调控,更高效更精准地表达外源基因。

 

新闻图片4

应用实例

1. AAV在神经系统中的应用

代表文献 吉凯客户文章Molecular Psychiatry,(2017)00,1-13

新闻图片5

文献来源:Li M X, Zheng H L, Luo Y, et al. Gene deficiency and pharmacological inhibition of caspase-1 confers resilience to chronic social defeat stress via regulating the stability of surface AMPARs[J]. Molecular Psychiatry, 2018, 23(3): 556-568.

代表文献 吉凯客户文章Neuropharmacology, 128(2018) 207-220.

新闻图片6

文献来源:Li Y, Wang L, Zhang X, et al. Inhibition of Cdk5 rejuvenates inhibitory circuits and restores experience-dependent plasticity in adult visual cortex[J]. Neuropharmacology, 2018, 128: 207-220.

2. AAV在脑血管中的应用

代表文献 吉凯客户文章Nature Communications,2023, 14(1):489.

新闻图片7

文献来源:Li B, Xi W, Bai Y, et al. FTO-dependent m6A modification of Plpp3 in circSCMH1-regulated vascular repair and functional recovery following stroke[J]. Nature Communication, 2023, 14(1): 489.

3. AAV在脂肪中的应用

代表文献 吉凯客户文章Jci Insight,2017,2(4):e89044(IF:9.484)

新闻图片8

文献来源:Yang X, Sui W, Zhang M, et al. Switching harmful visceral fat to beneficial energy combustion improves metabolic dysfunctions[J]. JCI Insight, 2017, 2(4): e89044.

4. AAV在肝脏中的应用

代表文献 吉凯客户文章Journal of Clinical Investigation,2022,7(23): e162402

新闻图片9

文献来源:Li Y, Xiu W, Xu J, et al. Increased CHCHD2 expression promotes liver fibrosis in nonalcoholic steatohepatitis via Notch/osteopontin signaling[J]. JCI Insight, 2022, 7(23): e162402.

引用文献

1.Shen Z C, Wu P F, Wang F, et al. Gephyrin Palmitoylation in Basolateral Amygdala Mediates the Anxiolytic Action of Benzodiazepine[J]. Biological Psychiatry, 2019, 85(3): 202-213. (IF= 12.81).吉凯产品:过表达AAV  研究领域:焦虑症华中科技大学同济医学院

2.Li M X, Zheng H L, Luo Y, et al. Gene deficiency and pharmacological inhibition of caspase-1 confers resilience to chronic social defeat stress via regulating the stability of surface AMPARs[J]. Molecular Psychiatry, 2018, 23(3): 556-568. (IF= 13.437).吉凯产品:过表达AAV  血清型:AAV1  研究领域:抑郁症华中科技大学同济医学院

3.Song L, Wang H, Wang Y J, et al. Hippocampal PPARα is a novel therapeutic target for depression and mediates the antidepressant actions of fluoxetine in mice[J]. British Journal of Pharmacology, 2018, 175(14): 2968-2987. (IF= 9.473).吉凯产品:干扰AAV  研究领域:抑郁症南通大学药学院

4.Li H, Xu H, Wen H, et al. Overexpression of LH3 reduces the incidence of hypertensive intracerebral hemorrhage in mice[J]. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism, 2019, 39(3): 547-561. (IF= 6.96).吉凯产品:干扰AAV  血清型:AAV9  研究领域:高血压性脑出血中国医学科学院阜外医院

5.Han C L, Ge M, Liu Y P, et al. Long non-coding RNA H19 contributes to apoptosis of hippocampal neurons by inhibiting let-7b in a rat model of temporal lobe epilepsy[J]. Cell Death & Disease, 2018, 9(6): 617. (IF= 9.685).吉凯产品:干扰和过表达AAV  血清型:AAV9  研究领域:颞叶癫痫首都医科大学

6.Jin S, Li H, Han M, et al. Mesenchymal Stem Cells with Enhanced Bcl-2 Expression Promote Liver Recovery in a Rat Model of Hepatic Cirrhosis[J]. Cellular Physiology and Biochemistry, 2016, 40(5): 1117-1128. (IF= 5.5).吉凯产品:过表达AAV  研究领域:肝硬化哈尔滨医科大学附属第二医院

7.Han C L, Ge M, Liu Y P, et al. LncRNA H19 contributes to hippocampal glial cell activation via JAK/STAT signaling in a rat model of temporal lobe epilepsy[J]. Journal of Neuroinflammation, 2018, 15(1): 103. (IF= 9.587).吉凯产品:干扰和过表达AAV  血清型:AAV9  研究领域:颞叶癫痫首都医科大学

8.Deng S, Shu S, Zhai L, et al. Optogenetic Stimulation of mPFC Alleviates White Matter Injury-Related Cognitive Decline after Chronic Ischemia through Adaptive Myelination[J]. Advanced Science, 2023, 10(5): e2202976. (IF:17.521).吉凯产品:过表达AAV  研究领域:神经系统鼓楼医院医学院神经内科和药物生物技术国家重点实验室

9.Zhao Y, Zhu W, Wan T, et al. Vascular endothelium deploys caveolin-1 to regulate oligodendrogenesis after chronic cerebral ischemia in mice[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 6813. (IF: 17.694).吉凯产品:过表达AAV  研究领域:脑血管南京大学医学院附属金陵医院神经内科

 

 

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