一文搞懂巨噬细胞经典极化实验

巨噬细胞作为功能重要且多变的一类免疫细胞，对其的研究在近十年国自然申请以及CNS顶刊中持续被青睐。其涉及到的实验多种多样：吞噬、抗原递呈、代谢类型转换等等。今天我们要讨论的是巨噬细胞研究中最经典也是最关键的一项实验——巨噬细胞经典极化实验。

巨噬细胞的经典极化（Classical Polarization）是指静息期巨噬细胞（M0）在不同微环境刺激下分化为具有特定功能表型的过程，其中以 M1 型（促炎型）和 M2 型（抗炎 / 修复型）为代表。

【1】

脂多糖（LPS）、toll 样受体（TLR）配体。

细胞因子：干扰素 -γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）。

表面受体：CD80、CD86。

核心转录因子：NF-κB、IRF5。

细胞因子：TNF-α、IL-1β、IL-6。

趋化因子：CCL2、CXCL9、CXCL10。

效应分子：诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、活性氧（ROS）、一氧化氮（NO）。

免疫防御：清除胞内病原体（如细菌、病毒），通过 NO 和 ROS 杀伤微生物。

促炎反应：激活 T 细胞免疫，招募中性粒细胞和淋巴细胞至炎症部位。

抗肿瘤作用：通过直接杀伤或增强免疫监视抑制肿瘤细胞。

细胞因子： IL-4、IL-13；IL-10、TGF-β。

表面受体：CD206（甘露糖受体，MRC1）、CD163。

转录因子： PPARγ、STAT6。

细胞因子：IL-10、TGF-β。

生长因子： IGF-1、VEGF。

组织修复：促进血管生成、胶原沉积和伤口愈合。

抗炎作用：抑制过度免疫反应，清除凋亡细胞。

极化条件

M0诱导：PMA 50ng/mL 24h

M1极化：IFNγ 20ng/mL+LPS 100ng/mL 处理24h

M2极化：IL-4 20ng/mL+IL-13 20ng/mL 处理72h 

极化条件

M0诱导：M-GSF 50ng/mL

M1极化：IFNγ 20ng/mL+LPS 50ng/mL 处理24h

M2极化：IL-4 20ng/mL+IL-13 20ng/mL 处理72h 

极化条件

M1极化：LPS 100ng/ml 处理24h

M2极化：IL-4 20ng/mL 处理72h

4.小鼠BMDMs 诱导极化

极化条件

M0诱导：M-CSF 诱导

M1极化：LPS 100ng/ml 处理24h

M2极化：IL-4 20ng/mL 处理72h

我司实测数据：

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【参考文献】

1.Gao J, Liang Y, Wang L. Shaping Polarization Of Tumor-Associated Macrophages In Cancer Immunotherapy. Front Immunol. 2022 Jun 30;13:888713. doi: 10.3389/fimmu.2022.888713. PMID: 35844605; PMCID: PMC9280632.